目前ELISA法仍在研究當中占有著主流地位,
魚ELISA試劑盒的普遍應用使得實驗更加方便、經濟和準確,ELISPOT技術的優點也決定了它的發展潛力。LISPOT法來源于ELISA,相比較傳統的ELISA法有所突破,是定量ELISA技術的延伸和發展。由于游離的循環抗體或CK的半哀期不同,使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結合,傳統的酶聯免疫吸附法(ELISA法)不能確切的反映體內的抗體及CK的水平。80年代,國外的科研工作者根據ELISA技術的基本原理,建立了體外檢測特異性抗體分泌細胞和CK分泌細胞的固相酶聯免疫斑點技術(ELISPOT)。
魚ELISA試劑盒的操作使用說明:
1、標準品
(1)從試劑盒中取出一支標準品,于6000-10000rpm離心30秒。用1ml樣本稀釋液溶解,并用吸頭對準凍存管底部反復吸打5次以助溶解,充分混勻得到標準品S7,放置備用。
(2)取7個1.5ml離心管(S0-S6)依次排列,各加入250μl樣本稀釋液。吸取250μl標準品S7到*個離心管中(S6),輕輕吹打混勻。從S6中吸取250μl到第二個EP管中(S5),輕輕吹打混勻。以此類推進行標準品的倍比稀釋。S0為樣本稀釋液。
2、洗液工作液
濃洗滌液按1:25倍用去離子水進行稀釋。例如用量筒量取240ml去離子水,倒入燒杯或其他潔凈容器中,再量取10ml濃洗滌液,均勻加入,攪拌混勻,在臨用前配妥。濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3、標記抗體工作液
標記抗體液按1:100倍用標記抗體稀釋液進行稀釋。如10μl標記抗體加990μl標記抗體稀釋液,輕輕混勻,在臨用*分鐘內配妥。
4、辣根過氧化物酶標記親和素工作液
辣根過氧化物酶標記親和素按1:100倍用辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液進行稀釋。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液,輕輕混勻
以上就是魚ELISA試劑盒的操作使用說明